为建立人原代呼吸道上皮细胞(Human airway epithelial cell,hAEC)的培养方法,并在hAEC体系上探讨3-硫代吲哚类化合物RSV-A-4和免疫抑制剂代谢产物6-MMPr的抗呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)活性及其机制,从而构建可用于RSV药物筛选及药效评价的细胞模型.采集人呼吸道上皮细胞样本,分离细胞后建立hAEC的培养方法,并进行细胞形态和活力鉴定;在hAEC体系上检测小分子化合物RSV-A-4和6-MMPr的抗RSV活性及其细胞毒性;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)与Time-of-addition assay技术,探讨RSV-A-4和6-MMPr的抑制RSV复制的作用机制.培养的hAEC经鉴定:其体外培养存活率可达93.51％;RSV-A-4和6-MMPr的半数抑制浓度(Half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为(207.30±4.77)μmol/L 和(3191.00±6.11)μmol/L,6-MMPr 的半数细胞毒性浓度(Half maximal cytotoxic concentration,CC50)为(95 526.00±10.97)μmol/L,而 RSV-A-4对hAEC未见明显细胞毒性;RSV-A-4和6-MMPr均在RSV病毒基因组复制阶段抑制RSV复制.成功建立可用于抗RSV药物筛选及体外评价的hAEC培养体系,RSV-A-4和6-MMPr在细胞水平均能有效抑制RSV复制.

作者：丁惠如；赵敏；程宁宁；付远辉；彭向雷；虞结梅；郑妍鹏；何金生

来源：生物学杂志 2024 年 41卷 1期