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目的 探讨miR-145-5p对脓毒症小鼠心肌损伤的保护作用及其机制.方法 80只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术+尾静脉注射agomir-NC组(sham+ago-NC)、假手术+尾静脉注射agomir-miR-145-5p组(sham+ago-miR)、脓毒症+尾静脉注射agomir-NC组(CLP+ago-NC)和脓毒症+尾静脉注射agomir-miR-145-5p组(CLP+ago-miR),每组20只.采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型.绘制小鼠生存曲线,ELISA法检测血清心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和肌钙蛋白I(cTnI)水平以及促炎细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达,HE染色观察心肌组织微观结构,超声仪检测心脏收缩功能(LVEF、LVFS),免疫荧光染色检测CD68、Ly6G、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达情况,碘化丙啶染色评估心肌细胞焦亡,qRT-PCR检测miR-145-5p表达,Western blot检测NLRP3、ASC、裂解的半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(cleaved Caspase-1)、白细胞介素18(IL-18)和GasderminD蛋白N端片段(N-GSDMD)蛋白表达.结果 与sham+ago-NC组相比,CLP+ago-NC组小鼠生存率明显下降(P<0.001),血清CK-MB和cTnI水平显著升高(P<0.01),心肌纤维排列紊乱且断裂明显,LVEF、LVFS值显著降低(P<0.01),心肌C

作者:胡培静;张学丹;屈欣怡;李炜;曹彪

来源:山西医科大学学报 2023 年 54卷 12期

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作者:
胡培静;张学丹;屈欣怡;李炜;曹彪
来源:
山西医科大学学报 2023 年 54卷 12期
标签:
miR-145-5p 脓毒症 心肌损伤 炎症 焦亡 miR-145-5p sepsis myocardial injury inflammation pyroptosis
目的 探讨miR-145-5p对脓毒症小鼠心肌损伤的保护作用及其机制.方法 80只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术+尾静脉注射agomir-NC组(sham+ago-NC)、假手术+尾静脉注射agomir-miR-145-5p组(sham+ago-miR)、脓毒症+尾静脉注射agomir-NC组(CLP+ago-NC)和脓毒症+尾静脉注射agomir-miR-145-5p组(CLP+ago-miR),每组20只.采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型.绘制小鼠生存曲线,ELISA法检测血清心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和肌钙蛋白I(cTnI)水平以及促炎细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达,HE染色观察心肌组织微观结构,超声仪检测心脏收缩功能(LVEF、LVFS),免疫荧光染色检测CD68、Ly6G、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达情况,碘化丙啶染色评估心肌细胞焦亡,qRT-PCR检测miR-145-5p表达,Western blot检测NLRP3、ASC、裂解的半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(cleaved Caspase-1)、白细胞介素18(IL-18)和GasderminD蛋白N端片段(N-GSDMD)蛋白表达.结果 与sham+ago-NC组相比,CLP+ago-NC组小鼠生存率明显下降(P<0.001),血清CK-MB和cTnI水平显著升高(P<0.01),心肌纤维排列紊乱且断裂明显,LVEF、LVFS值显著降低(P<0.01),心肌C

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