目的 分析N6甲基腺苷(m6A)甲基转移酶3(methyltransferase-like 3,METTL3)和miR-127在非小细胞肺癌(non small cell lung cancer cells,NSCLC)细胞系中的表达及其相关性,并探究METTL3介导miR-127调控非小细胞肺癌自噬的作用机制.方法 采用qRT-PCR法检测正常肺上皮细胞BEAS-2B与非小细胞肺癌细胞HCC827,A549和H460中METTL3和miR-127的表达水平;通过Linked Domics数据库筛选出肺癌中与miR-127共表达的基因,并分析METTL3和miR-127之间的相关性;选择H460细胞传代培养至对数生长期后,将浓度接近的细胞随机分为三组,分别转染METTL3-siR,NC-siR及Control,验证转染后H460细胞中METTL3和miR-127表达;通过吖啶橙染色,Lyso-Tracker Red染色观察METTL3对细胞自噬的影响;利用Western blot检测PTEN,AKT,mTOR,ULK1,Beclin-1等自噬相关蛋白的表达.结果 非小细胞肺癌细胞HCC827,A549,H460中METTL3相对表达分别为1.35±0.17,1.54±0.11和1.78±0.21,明显高于正常肺上皮细胞BEAS-2B中表达水平(0.91±0.11),差异有统计学意义(F=34.037,P=0.002).非小细胞肺癌细胞HCC827,A549,H460中miR-127相对表达分别为1.56±0.21,1.85±0.19和2.11±0.25,较正常肺上皮细胞BEAS-2B中表达(1.02±0.20)亦显著升高,差异有统计学意义(F=28.152,P
作者:伍义文;曹健斌;黄维佳;何凌云
来源:现代检验医学杂志 2022 年 37卷 2期