目的 探究微小核糖核酸(microRNAs,miRNA,miR)-203a-3p对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其潜在分子机制.方法 采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测HCC细胞、人正常肝细胞以及临床HCC组织中miR-203a-3p相对表达;采用细胞增殖实验、细胞划痕实验和Transwell实验分别检测miR-203a-3p对HCC细胞增殖、迁移、侵袭的影响;生物信息学网站预测miR-203a-3p的潜在靶基因(GLS1),双荧光素酶实验进行验证;探究HCC细胞对谷氨酰胺的依赖性及抑制谷氨酰胺酶1(glutaminase 1,GLS1)对HCC细胞增殖、迁移、侵袭的影响;蛋白免疫印迹(Western blot)实验检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白β-catenin,p-GSK-3β和c-Myc表达.结果 HCC癌组织中miR-203a-3p(0.32±0.07)表达明显低于癌旁正常组织(1.02±0.03),差异有统计学意义(t=41.105,P<0.001);HCC细胞HepG2(0.34±0.05),HCCLM3(0.58±0.06),Huh7(0.43±0.05),Hep3B(0.29±0.04)中miR-203a-3p相对表达水平明显低于人正常肝细胞LO2(1.01±0.02)中miR-203a-3p表达,差异有统计学意义(F=119.080,P<0.001).与Blank组相比,miR-203a-3p过表达组HCC细胞增殖(0.61±0.05 vs 1.24±0.06),迁移率(21.43%±2.01%vs 60.22%±
作者:时晓晓;董翔;于若卉;苏君君;齐东东;白杨;董猛
来源:现代检验医学杂志 2022 年 37卷 5期