目的:探讨迁移侵袭抑制蛋白(migration invasion inhibitory protein,MIIP)对膀胱癌 T24细胞增殖和迁移侵袭能力的影响及作用机制。方法:设计并合成 MIIP 过表达质粒,并利用脂质体转染方法上调 T24细胞系中 MIIP 的表达。Western blot 及实时定量聚合酶链反应(Real -time PCR)检测过表达 MIIP 的效果,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)及平板克隆法观察 MIIP 过表达对 T24细胞增殖能力的影响,划痕及 Transwell 实验检验 MIIP过表达对 T24细胞迁移侵袭能力的影响。Western blot 及 Real -time PCR 检测过表达 MIIP 后其上皮间充质转化(epithelial -mesenchymal transition,EMT)过程相关标志物钙黏蛋白 E(E -cadherin)、钙连蛋白 N(N -cadherin)、转录因子 Snail 蛋白和 mRNA 变化情况。结果:过表达质粒能有效上调 T24细胞系中 MIIP 蛋白及mRNA 的表达,上调 MIIP 表达后 T24细胞增殖能力明显下降,克隆形成能力下降,迁移侵袭能力减弱;上调MIIP 表达后 E -cadherin 表达增加,N -cadherin 及转录因子 Snail 表达减少。结论:过表达 MIIP 可能通过降解转录因子 Snail,从而抑制 EMT 进程降低膀胱癌 T24细胞的增殖及迁移侵袭能力。
作者:严奉奇;王秦豪;茹懿;马柳疆;陶光晶;张梅;张耀;药立波;李霞;武国军
来源:现代肿瘤医学 2016 年 24卷 7期