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目的:探讨miR-21如何通过对TIMP3表达的调控,从而影响HeLa宫颈癌细胞系的生长和凋亡。方法:转染miR-21抑制性核苷酸(AS-miR-21)下调HeLa细胞系中miR-21表达水平,MTT实验和流式细胞术分别检测细胞生长和凋亡,采用实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot测量TIMP3 mRNA和蛋白质表达水平变化,双荧光素报告系统检测miR-21对TIMP3的直接调节。AS-miR-21和TIMP3 siRNA共转染HeLa细胞系,MTT和流式细胞术检测细胞生长、凋亡的变化。结果:下调miR-21后,HeLa细胞的生长能力较对照组明显降低(P<0.05),凋亡显著增加(P<0.05),TIMP3 mRNA和蛋白质表达水平显著增高(P<0.05)。双荧光素报告实验显示TIMP3受miR-21的直接调节。共转染AS-miR-21和TIMP3 siRNA可显著缓解下调miR-21引起的生长抑制和凋亡诱导。结论:miR-21可通过调节TIMP3的表达水平,参与调节宫颈癌细胞生长和凋亡。本研究结果提示miR-21在宫颈癌恶性生物学进程中可能发挥重要作用。

作者:梁亮;张寅斌;张扬;昝瑛

来源:现代肿瘤医学 2016 年 24卷 19期

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作者:
梁亮;张寅斌;张扬;昝瑛
来源:
现代肿瘤医学 2016 年 24卷 19期
标签:
miR-21 TIMP3 HeLa细胞 生长 凋亡 miR-21 TIMP3 HeLa cell viability apoptosis
目的:探讨miR-21如何通过对TIMP3表达的调控,从而影响HeLa宫颈癌细胞系的生长和凋亡。方法:转染miR-21抑制性核苷酸(AS-miR-21)下调HeLa细胞系中miR-21表达水平,MTT实验和流式细胞术分别检测细胞生长和凋亡,采用实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot测量TIMP3 mRNA和蛋白质表达水平变化,双荧光素报告系统检测miR-21对TIMP3的直接调节。AS-miR-21和TIMP3 siRNA共转染HeLa细胞系,MTT和流式细胞术检测细胞生长、凋亡的变化。结果:下调miR-21后,HeLa细胞的生长能力较对照组明显降低(P<0.05),凋亡显著增加(P<0.05),TIMP3 mRNA和蛋白质表达水平显著增高(P<0.05)。双荧光素报告实验显示TIMP3受miR-21的直接调节。共转染AS-miR-21和TIMP3 siRNA可显著缓解下调miR-21引起的生长抑制和凋亡诱导。结论:miR-21可通过调节TIMP3的表达水平,参与调节宫颈癌细胞生长和凋亡。本研究结果提示miR-21在宫颈癌恶性生物学进程中可能发挥重要作用。

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