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目的:探讨短发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)干扰CXC趋化因子受体1(CXC chemokine recep-tor 1,CXCR1)基因表达对肺癌顺铂耐药性的影响及其对核转录因子NF-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)信号通路的调控作用.方法:qRT-PCR与Western blot分别检测人肺泡上皮细胞HBE与肺癌细胞(A549、H157、H460)中CXCR1 mRNA及蛋白表达水平.收集对数期的A549细胞,分为两组:Ctrl.shRNA组、CXCR1 shRNA组.MTT检测细胞增殖能力,并计算顺铂的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50);流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测CXCR1蛋白表达;利用脂质体转染技术分别将Ctrl.shRNA、CXCR1 shRNA转染至A549/DDP细胞,观察细胞增殖、凋亡能力的变化;Western blot检测CXCR1、CyclinD1、C-caspase-3、MRP1、NF-κB p65蛋白表达量.结果:与HBE细胞相比,肺癌细胞A549、H157、H460中CXCR1 mRNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05);A549细胞中转染CXCR1 shRNA后,与Ctrl.shRNA组相比,细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05);与A549细胞相比,A549/DDP细胞中CXCR1、MRP1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),顺铂IC50值显著升高(P<0.05);A549/DDP细胞中转染CXCR1shRNA后,与Ctrl.shRNA组相比,MRP1、NF-κB p65

作者:张璐;陈晓玲

来源:现代肿瘤医学 2021 年 29卷 13期

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作者:
张璐;陈晓玲
来源:
现代肿瘤医学 2021 年 29卷 13期
标签:
CXCR1 短发夹RNA 肺癌 NF-κB信号通路 顺铂耐药性
目的:探讨短发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)干扰CXC趋化因子受体1(CXC chemokine recep-tor 1,CXCR1)基因表达对肺癌顺铂耐药性的影响及其对核转录因子NF-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)信号通路的调控作用.方法:qRT-PCR与Western blot分别检测人肺泡上皮细胞HBE与肺癌细胞(A549、H157、H460)中CXCR1 mRNA及蛋白表达水平.收集对数期的A549细胞,分为两组:Ctrl.shRNA组、CXCR1 shRNA组.MTT检测细胞增殖能力,并计算顺铂的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50);流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测CXCR1蛋白表达;利用脂质体转染技术分别将Ctrl.shRNA、CXCR1 shRNA转染至A549/DDP细胞,观察细胞增殖、凋亡能力的变化;Western blot检测CXCR1、CyclinD1、C-caspase-3、MRP1、NF-κB p65蛋白表达量.结果:与HBE细胞相比,肺癌细胞A549、H157、H460中CXCR1 mRNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05);A549细胞中转染CXCR1 shRNA后,与Ctrl.shRNA组相比,细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05);与A549细胞相比,A549/DDP细胞中CXCR1、MRP1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),顺铂IC50值显著升高(P<0.05);A549/DDP细胞中转染CXCR1shRNA后,与Ctrl.shRNA组相比,MRP1、NF-κB p65

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