目的:探究膀胱癌细胞系MB49来源的外泌体(MB49-Exo)对髓系来源的抑制性细胞(MDSCs)的影响及后者对MB49抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫功能的调控.方法:试剂盒分离MB49-Exo,并应用透射电子显微镜(TEM)观察外泌体形态,纳米粒径颗粒跟踪分析仪(NTA)和Western blot进行鉴定;构建Balb/c小鼠MB49-Exo荷瘤模型,设置PBS作为阴性对照,MB49荷瘤小鼠为阳性对照,使用流式细胞术检测小鼠骨髓与脾脏中MDSCs的表达及分型和脾脏中CD8+T淋巴细胞数量;分离培养小鼠原代骨髓细胞,流式细胞术检测PBS与MB49-Exo对其向MDSCs分化的影响,并将两组不同处理的MDSCs记为PBS-MDSCs组与MB49-Exo-MDSCs组;使用MB49特异性抗原诱导小鼠成熟树突状细胞(DCs),并利用其制备膀胱癌抗原特异性CTL,再使用PBS-MDSCs与MB49-Exo-MDSCs组的MDSCs进行刺激,ELISA检测不同处理条件下CTL对白介素-1(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)的表达水平,羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂染色结合流式细胞术检测CTL的增殖水平,乳酸脱氢酶法检测CTL对MB49的杀伤活性,最后通过West-ern blot检测两组MDSCs中信号转导因子和转录激活因子3(STAT3)的磷酸化水平(p-STAT3/STAT3).结果:成功分离获得MB49-Exo;与对照组相比,MB49-Exo不仅能够明显促进荷瘤小鼠骨髓与脾脏中以粒

作者：陈金华；辜祖玄；邓立；潘维昕

来源：现代肿瘤医学 2022 年 30卷 6期