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目的:探讨异牡荆素(IVX)对胰腺癌(PCa)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及分子机制.方法:体外培养人PCa细胞系(PANC-1、AsPC-1、BxPC-3、Capan-1 和SW 1990)和人正常胰腺导管上皮细胞(HPDE),实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测细胞中微小RNA-107(miR-107)和细胞周期蛋白D1(CCND1)的表达.采用MTT法检测IVX对PANC-1 细胞的毒性作用;将PANC-1 细胞分为正常对照(NC)组、5 μmol/L IVX组、10 μmol/L IVX组、20 μmol/L IVX组、20 μmol/L IVX +anti-NC组、20 μmol/L IVX +anti-miR-107 组.细胞克隆形成实验检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;划痕愈合实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭;双荧光素酶报告基因检测和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验验证PANC-1 细胞中miR-107 和CCND1 的靶向关系;裸鼠成瘤实验、免疫组织化学(IHC)染色和qRT-PCR探究IVX对PCa细胞体内肿瘤生长和Ki-67、CCND1、miR-107 表达的影响.结果:在PCa细胞系中miR-107 呈低表达,CCND1 呈高表达.IVX以浓度依赖性方式抑制PANC-1 细胞增殖;5、10、20 μmol/L IVX以浓度依赖性方式抑制细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞周期停滞和细胞凋亡,上调miR-107 表达,降低CCND1 mRNA和蛋白水平(均P<0.05);且下

作者:玄鸿雁;阚璇;朱振胜

来源:现代肿瘤医学 2023 年 31卷 15期

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作者:
玄鸿雁;阚璇;朱振胜
来源:
现代肿瘤医学 2023 年 31卷 15期
标签:
胰腺癌 异牡荆素 微小RNA-107 细胞周期蛋白D1 增殖 凋亡 迁移 侵袭 pancreatic cancer isovitexin microRNA-107 cyclin D1 proliferation apoptosis migration invasion
目的:探讨异牡荆素(IVX)对胰腺癌(PCa)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及分子机制.方法:体外培养人PCa细胞系(PANC-1、AsPC-1、BxPC-3、Capan-1 和SW 1990)和人正常胰腺导管上皮细胞(HPDE),实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测细胞中微小RNA-107(miR-107)和细胞周期蛋白D1(CCND1)的表达.采用MTT法检测IVX对PANC-1 细胞的毒性作用;将PANC-1 细胞分为正常对照(NC)组、5 μmol/L IVX组、10 μmol/L IVX组、20 μmol/L IVX组、20 μmol/L IVX +anti-NC组、20 μmol/L IVX +anti-miR-107 组.细胞克隆形成实验检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;划痕愈合实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭;双荧光素酶报告基因检测和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验验证PANC-1 细胞中miR-107 和CCND1 的靶向关系;裸鼠成瘤实验、免疫组织化学(IHC)染色和qRT-PCR探究IVX对PCa细胞体内肿瘤生长和Ki-67、CCND1、miR-107 表达的影响.结果:在PCa细胞系中miR-107 呈低表达,CCND1 呈高表达.IVX以浓度依赖性方式抑制PANC-1 细胞增殖;5、10、20 μmol/L IVX以浓度依赖性方式抑制细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞周期停滞和细胞凋亡,上调miR-107 表达,降低CCND1 mRNA和蛋白水平(均P<0.05);且下

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