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目的 研究去甲斑蝥素(DMC)对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞凋亡的影响,探讨DMC致细胞凋亡后基因表达的变化.方法 20 mg·L-1 DMC作用细胞36 h后,倒置显微镜观察细胞形态变化;提取细胞DNA,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA改变;提取细胞总RNA,基因芯片技术检测基因表达谱变化;通过反转录(RT)-PCR、ELISA验证芯片部分基因表达变化.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 DMC处理K562细胞后,倒置显微镜下可见细胞状态变差,活细胞数目明显减少;DNA电泳后可见明显的阶梯状变化;在利用基因芯片技术检测的21 522个基因转录本中,共筛选出差异表达基因约2 300个,其中超过500个基因的表达明显升高,有350个基因表达显著降低;RT-PCR和ELISA结果显示,Bcl-2、E2F1和E2F3基因表达显著降低,RBl和P53表达显著增高,均与芯片结果一致.结论 DMC可致K562细胞凋亡,并可引起凋亡细胞相关基因表达变化.

作者:李有杰;张帅;王萍玉;高宗华;王秀文;谢书阳

来源:实用儿科临床杂志 2010 年 25卷 21期

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作者:
李有杰;张帅;王萍玉;高宗华;王秀文;谢书阳
来源:
实用儿科临床杂志 2010 年 25卷 21期
标签:
去甲斑蝥素 白血病 细胞凋亡 基因表达
目的 研究去甲斑蝥素(DMC)对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞凋亡的影响,探讨DMC致细胞凋亡后基因表达的变化.方法 20 mg·L-1 DMC作用细胞36 h后,倒置显微镜观察细胞形态变化;提取细胞DNA,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA改变;提取细胞总RNA,基因芯片技术检测基因表达谱变化;通过反转录(RT)-PCR、ELISA验证芯片部分基因表达变化.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 DMC处理K562细胞后,倒置显微镜下可见细胞状态变差,活细胞数目明显减少;DNA电泳后可见明显的阶梯状变化;在利用基因芯片技术检测的21 522个基因转录本中,共筛选出差异表达基因约2 300个,其中超过500个基因的表达明显升高,有350个基因表达显著降低;RT-PCR和ELISA结果显示,Bcl-2、E2F1和E2F3基因表达显著降低,RBl和P53表达显著增高,均与芯片结果一致.结论 DMC可致K562细胞凋亡,并可引起凋亡细胞相关基因表达变化.

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