目的 探讨环指蛋白99(RNF99)介导的转化生长因子激酶1(TAK1)/核因子-κB(NF-κB)信号通路参与泛素化与脓毒症性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的潜在联系.方法 进行质粒和siRNA转染以过表达或敲低小鼠肺泡上皮细胞(MLE12)中RNF99,分析磷酸p65和p65蛋白表达.免疫沉淀分析RNF99与TRAF6和TAK1的蛋白相互作用关系.将40只小鼠随机分成WT+PBS、WT+LPS、RNF99特异性表达(TG)+PBS和TG+LPS组,每组10只.通过腹膜内注射30 mg/kg LPS诱导脓毒症.结果 与Vector组相比,RNF99组MLE12细胞中TRAF6和TAK1的蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).泛素化TRAF6蛋白在RNF99敲低的MLE12细胞中增加.与LPS+Vector组相比,在LPS+RNF99组MLE12细胞中p65的磷酸化水平明显降低(P<0.05).与si-NC组相比,si-RNF99组MLE12细胞中RNF99、IκBα的蛋白表达水平显著降低(P<0.05).与LPS+si-NC组相比,在LPS+si-RNF99组MLE12细胞中p65的磷酸化水平明显增加(P<0.05).TG+LPS组小鼠肺组织中CD68巨噬细胞染色百分比较WT+LPS组显著降低(P<0.05).TG+ LPS组小鼠肺组织中p65的磷酸化水平显著低于WT+LPS组小鼠(P<0.05).结论 RNF99通过与NF-κB信号通路的关键调节因子(TRAF6/TAK1)相互作用来调节NF-κB信号通路,并改善小鼠腹腔注射LPS后肺损伤.

作者：张弛；胡赛；王静；夏凤强；程晓英；甘泽英

来源：实用医学杂志 2024 年 40卷 5期