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目的:探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)激动剂吡格列酮(PIO)对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化的作用及其相关机制. 方法:利用10 mmol/L β甘油磷酸(β-GP)诱导大鼠VSMC钙化,建立钙化模型(即钙化组);同时以完全培养基培养大鼠VSMC为正常对照组,并分别以不同浓度(5 μmoL/L、10μmoL/L、15 μmol/L、20 μmol/L)PIO干预,观察培养12d,用茜素红染色法检测细胞钙沉积并检测细胞外基质钙离子浓度来观察VSMC钙化程度.Western Blot检测大鼠VSMC的α平滑肌动蛋白(α-SMA)、Runx2、BMP2、Wnt/β-catenin通路相关蛋白(β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β)及核蛋白cyclin-D1的表达情况.选择合适的PIO浓度(20μmol/L)并以PPARγ拮抗剂GW9662(20 μmol/L)干预,观察以上指标的变化. 结果:(1)钙化组钙离子浓度较正常对照组明显增高(P<0.05),而不同浓度PIO均可减轻VSMC细胞外基质的钙离子浓度(P<0.05),同时钙化组茜素红染色较正常对照组明显,而20μmol/L PlO干预组茜素红染色较钙化组减轻最为明显;(2)钙化组大鼠VSMC表达Runx2、β-catenin、p-GSK-3β、BMP2、cyclin-D1较正常对照组升高;20μmol/L PIO可显著下调钙化大鼠VSMC表达Runx2、β-eatenin、p-GSK-3β、BMP2和cyclin-D1,并上调α-SMA的表达;(3)PP

作者:高敏;陈天雷;吴琳;赵秀芬;邢昌赢;毛慧娟

来源:肾脏病与透析肾移植杂志 2016 年 25卷 4期

知识库介绍

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作者:
高敏;陈天雷;吴琳;赵秀芬;邢昌赢;毛慧娟
来源:
肾脏病与透析肾移植杂志 2016 年 25卷 4期
标签:
过氧化物酶体增殖物活化受体γ 血管钙化 血管平滑肌细胞 Wnt/β-catenin信号通路 peroxisome proliferator-activated receptor gamma vascular smooth muscle cells calcification Wnt/β-catenin signaling pathway
目的:探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)激动剂吡格列酮(PIO)对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化的作用及其相关机制. 方法:利用10 mmol/L β甘油磷酸(β-GP)诱导大鼠VSMC钙化,建立钙化模型(即钙化组);同时以完全培养基培养大鼠VSMC为正常对照组,并分别以不同浓度(5 μmoL/L、10μmoL/L、15 μmol/L、20 μmol/L)PIO干预,观察培养12d,用茜素红染色法检测细胞钙沉积并检测细胞外基质钙离子浓度来观察VSMC钙化程度.Western Blot检测大鼠VSMC的α平滑肌动蛋白(α-SMA)、Runx2、BMP2、Wnt/β-catenin通路相关蛋白(β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β)及核蛋白cyclin-D1的表达情况.选择合适的PIO浓度(20μmol/L)并以PPARγ拮抗剂GW9662(20 μmol/L)干预,观察以上指标的变化. 结果:(1)钙化组钙离子浓度较正常对照组明显增高(P<0.05),而不同浓度PIO均可减轻VSMC细胞外基质的钙离子浓度(P<0.05),同时钙化组茜素红染色较正常对照组明显,而20μmol/L PlO干预组茜素红染色较钙化组减轻最为明显;(2)钙化组大鼠VSMC表达Runx2、β-catenin、p-GSK-3β、BMP2、cyclin-D1较正常对照组升高;20μmol/L PIO可显著下调钙化大鼠VSMC表达Runx2、β-eatenin、p-GSK-3β、BMP2和cyclin-D1,并上调α-SMA的表达;(3)PP

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