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目的 研究卵巢颗粒细胞中胰岛素对睾酮激素转化过程的影响.方法 选用人卵巢颗粒细胞瘤样细胞系(KGN)作为研究对象.应用RT-PCR分析KGN细胞在梯度睾酮(1.25、2.5、5、10、20 ng/ml)及胰岛素(1、10、100 ng/ml)处理4 h后CYP19a1和5RD5A1 mRNA水平;Western-blot检测高浓度睾酮(10、20 ng/ml)及梯度胰岛素处理KGN细胞24 h后芳香化酶和5α-还原酶1蛋白水平;同步收集上清,应用放射性免疫法及酶联免疫法检测培养液上清睾酮、雌二醇及双氢睾酮的浓度.结果 胰岛素剂量依赖性地上调CYP19a1的表达和活性,增加睾酮向雌二醇的转化;同时抑制5RD5A1的表达和活性,抑制睾酮向双氢睾酮的转化;转化比例改变但消耗水平不变,导致睾酮的异常累积.结论 高雄激素环境下,胰岛素可通过影响睾酮转化酶促使睾酮转化异常.本实验为高胰岛素及高雄激素水平在卵巢微环境相互作用加剧PCOS病程提出了可能的机制.

作者:张璐;李安迪;杨楠;蒋葭葭;孙玉洁

来源:生殖医学杂志 2017 年 26卷 7期

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作者:
张璐;李安迪;杨楠;蒋葭葭;孙玉洁
来源:
生殖医学杂志 2017 年 26卷 7期
标签:
颗粒细胞瘤样细胞系 胰岛素 睾酮 芳香化酶 5α-还原酶1 KGN cell Insulin Aromatase 5α-reductase 1 Testosterone
目的 研究卵巢颗粒细胞中胰岛素对睾酮激素转化过程的影响.方法 选用人卵巢颗粒细胞瘤样细胞系(KGN)作为研究对象.应用RT-PCR分析KGN细胞在梯度睾酮(1.25、2.5、5、10、20 ng/ml)及胰岛素(1、10、100 ng/ml)处理4 h后CYP19a1和5RD5A1 mRNA水平;Western-blot检测高浓度睾酮(10、20 ng/ml)及梯度胰岛素处理KGN细胞24 h后芳香化酶和5α-还原酶1蛋白水平;同步收集上清,应用放射性免疫法及酶联免疫法检测培养液上清睾酮、雌二醇及双氢睾酮的浓度.结果 胰岛素剂量依赖性地上调CYP19a1的表达和活性,增加睾酮向雌二醇的转化;同时抑制5RD5A1的表达和活性,抑制睾酮向双氢睾酮的转化;转化比例改变但消耗水平不变,导致睾酮的异常累积.结论 高雄激素环境下,胰岛素可通过影响睾酮转化酶促使睾酮转化异常.本实验为高胰岛素及高雄激素水平在卵巢微环境相互作用加剧PCOS病程提出了可能的机制.

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