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目的:构建大鼠谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达重组子,探索一条真核细胞高效表达rGAD的新途径.方法:以pUC18-GAD质粒为模板PCR扩增出大鼠GAD65基因,将其克隆入PGEM-Teasy载体,继而将其克隆到毕赤酵母分泌型质粒表达载体pPIC9K中,重组质粒线性化后PEG法转染入毕赤酵母菌株GS115,PCR筛选转化子.结果:DNA序列分析和PCR鉴定表明成功构建了大鼠谷氨酸脱羧酶(GAD)毕赤酵母表达重组子.结论:为今后基因工程大量生产GAD抗原打下了基础.
作者：张颖；郭善一；梁东春；王宝利
来源：天津医科大学学报 2004 年 10卷 1期
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