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目的:将缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因转染体外培养大鼠骨骼肌细胞,观察转染后细胞上清液中VEGF蛋白的表达及其对血管内皮细胞增殖的影响.方法:利用机械和酶消化法分离培养大鼠骨骼肌细胞,贴块法培养血管内皮细胞;用阳离子脂质体介导pHOX/HIF-1α质粒转染骨骼肌细胞,ELISA法检测转染后VEGF蛋白的分泌情况,MTT法检测其对血管内皮细胞增殖的影响.结果:成功将HIF-1α基因转染大鼠骨骼肌细胞,转染组细胞培养上清中24、48、72和96 h检测到VEGF含量分别为(1 308.40~102.00)、(1 449.20~69.86)、(1 802.30~96.71)和(1 494.95~86.24)pg/ml,明显高于对照组;转染后骨骼肌细胞分泌的VEGF对血管内皮细胞有显著的促增殖作用.结论:HIF-1α基因转染大鼠的骨骼肌细胞后可增加具有正常功能的VEGF蛋白的分泌,促进血管内皮细胞的增殖.

作者:陈博;陈剑秋

来源:天津医科大学学报 2010 年 16卷 3期

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作者:
陈博;陈剑秋
来源:
天津医科大学学报 2010 年 16卷 3期
标签:
缺氧诱导因子-1α 骨骼肌细胞 内皮细胞 血管内皮生长因子 基因转染
目的:将缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因转染体外培养大鼠骨骼肌细胞,观察转染后细胞上清液中VEGF蛋白的表达及其对血管内皮细胞增殖的影响.方法:利用机械和酶消化法分离培养大鼠骨骼肌细胞,贴块法培养血管内皮细胞;用阳离子脂质体介导pHOX/HIF-1α质粒转染骨骼肌细胞,ELISA法检测转染后VEGF蛋白的分泌情况,MTT法检测其对血管内皮细胞增殖的影响.结果:成功将HIF-1α基因转染大鼠骨骼肌细胞,转染组细胞培养上清中24、48、72和96 h检测到VEGF含量分别为(1 308.40~102.00)、(1 449.20~69.86)、(1 802.30~96.71)和(1 494.95~86.24)pg/ml,明显高于对照组;转染后骨骼肌细胞分泌的VEGF对血管内皮细胞有显著的促增殖作用.结论:HIF-1α基因转染大鼠的骨骼肌细胞后可增加具有正常功能的VEGF蛋白的分泌,促进血管内皮细胞的增殖.

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