目的:观察黄连素对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的血管内皮细胞生长因子(vascu-lar endothelial growth factor,VEGF)表达的影响及探讨其可能机制。方法实验分两部分,第1部分:以10 ng/mL 的TNF-α分别作用人肝癌细胞(HepG2)0、12、24、48 h;第2部分:分别以0、10、25、50μmol/L 的黄连素预孵育 HepG2细胞24 h后,继续与TNF-α共孵育24 h。MTT法检测黄连素对 HepG2细胞增殖能力的影响;Real-time PCR检测各组细胞VEGF mRNA水平;Western blot检测各组细胞VEGF、IκBα、NF-κB p65蛋白表达;ELISA检测NF-κB的活性。结果黄连素对 HepG2细胞生长的抑制能力呈浓度依赖性;TNF-α显著上调 HepG2细胞中VEGF mRNA和蛋白表达且呈时间依赖性;黄连素显著下调TNF-α诱导的 HepG2细胞中 VEGF mRNA 和蛋白表达且呈浓度依赖性;TNF-α显著下调 IκBα表达且呈时间依赖性,上调 NF-κB P65的表达及NF-κB活性且呈时间依赖性;黄连素显著上调IκBα表达且呈浓度依赖性,下调 NF-κB P65的表达及 NF-κB活性且呈浓度依赖性。结论 TNF-α在 HepG2细胞中能上调 VEGF的表达,而黄连素能下调由其诱导的 VEGF表达,可能是通过 NF-κB信号通路所介导的。
作者:李井彬;柯善栋;胡少明
来源:华中科技大学学报(医学版) 2014 年 4期