目的 利用细胞模型研究非诺贝特在缓解非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的作用及其分子机制.方法 首先以0～0.9 mmol/L梯度浓度的油酸处理正常肝细胞LO2 48 h建立脂肪肝细胞模型;同时,以非诺贝特处理正常细胞或模型组细胞48 h,然后用CCK-8试剂盒测定细胞活力,用油红O染色观察细胞内脂滴形成或抑制情况,利用试剂盒检测细胞中的三酰甘油(TG)以及上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,蛋白质免疫印迹法检测细胞中蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、FSAN及Nrf2蛋白水平,并使用2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)检测细胞内的活性氧自由基(ROS)含量.结果 油酸浓度超过0.5 mmol/L后细胞活力显著降低,非诺贝特可抑制高浓度油酸对细胞的损伤.油酸处理后细胞中出现大量脂滴,细胞内TG含量以及上清液中的ALT、AST水平显著升高,给予非诺贝特处理后细胞中脂滴减少,TG、ALT和AST含量均显著降低.油酸处理后细胞中AKT、p-AKT、FSAN和Nrf2蛋白水平升高,给予非诺贝特可抑制上述蛋白水平的升高.同时,非诺贝特逆转了由油酸导致的细胞内ROS累积.结论 非诺贝特可以抑制油酸引起的脂肪积累,并缓解脂肪累积导致的细胞损伤,其机制是通过下调AKT/FSAN信号通路,从而降低ROS水平,进而减少ROS导致的细胞损伤.
作者：郭骏；陈玉媛；叶枫；李斌；徐传瑞
来源：华中科技大学学报（医学版） 2017 年 46卷 3期
