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目的 建立单管检测人维生素D受体(VDR)及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因的双重实时荧光定量聚合酶链反应(dual real-time PCR)的方法.方法 以GAPDH基因为内参,采用Primer Premier 5.0软件设计特异性引物及TaqMan探针,进行PCR扩增检测VDR基因.将VDR及GAPDH扩增产物片段纯化后克隆构建成重组质粒,作为定量检测基因表达的标准品,并用于分析该方法的灵敏度和重复性.结果 PCR扩增产物经测序分析证实为VDR及GAPDH特异性片段;该方法检测VDR与GAPDH灵敏度达40拷贝/μL;线性范围为4.00×101~4.00×105拷贝/μL;决定系数R2分别为0.998、0.999;扩增效率E分别为96.10
作者：喻妙梅；于洋；张俊；姚霜；潘丽莉；罗光华
来源：天津医药 2016 年 44卷 2期
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