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目的 探讨microRNA(miR)-145通过CD40对泡沫细胞免疫炎症反应的影响.方法 体外培养小鼠巨噬细胞系RAW 264.7细胞,随机均分为模型组(不转染)、miR-145 mimics组(转染miR-145 mimics)、miR-145 inhibitor组(转染miR-145 inhibitor)、沉默CD40序列组(转染siCD40),转染6 h之后,用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激24 h诱导形成泡沫细胞.应用real-time qPCR(RT-qPCR)和Western blot检测各组细胞中CD40 mRNA和蛋白的表达情况;ELISA法检测细胞上清液中炎症因子白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平.结果 与模型组相比,miR-145 mimics组CD40 mRNA、蛋白及IL-1、IL-6、TNF-α的表达水平均明显下降(P<0.01);经miR-145抑制剂干预后,上述指标均较模型组和miR-145 mimics组升高(P<0.01);而转染沉默CD40序列后,CD40 mRNA、蛋白及IL-1、IL-6、TNF-α的表达水平较miR-145抑制剂组均明显下降(P<0.01).结论 miR-145可通过靶基因CD40调控泡沫细胞免疫炎症过程,抑制CD40/CD40L信号通路活化,抑制炎症反应.

作者:刘恩照;路利平;刘运龄;梁雪;李广平

来源:天津医药 2017 年 45卷 12期

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作者:
刘恩照;路利平;刘运龄;梁雪;李广平
来源:
天津医药 2017 年 45卷 12期
标签:
微RNAs 抗原,CD40 泡沫细胞 转染 白细胞介素6 肿瘤坏死因子α miR-145 microRNAs antigens,CD40 foam cells transfection interleukin-6 tumor necrosis factor-alpha miR-145
目的 探讨microRNA(miR)-145通过CD40对泡沫细胞免疫炎症反应的影响.方法 体外培养小鼠巨噬细胞系RAW 264.7细胞,随机均分为模型组(不转染)、miR-145 mimics组(转染miR-145 mimics)、miR-145 inhibitor组(转染miR-145 inhibitor)、沉默CD40序列组(转染siCD40),转染6 h之后,用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激24 h诱导形成泡沫细胞.应用real-time qPCR(RT-qPCR)和Western blot检测各组细胞中CD40 mRNA和蛋白的表达情况;ELISA法检测细胞上清液中炎症因子白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平.结果 与模型组相比,miR-145 mimics组CD40 mRNA、蛋白及IL-1、IL-6、TNF-α的表达水平均明显下降(P<0.01);经miR-145抑制剂干预后,上述指标均较模型组和miR-145 mimics组升高(P<0.01);而转染沉默CD40序列后,CD40 mRNA、蛋白及IL-1、IL-6、TNF-α的表达水平较miR-145抑制剂组均明显下降(P<0.01).结论 miR-145可通过靶基因CD40调控泡沫细胞免疫炎症过程,抑制CD40/CD40L信号通路活化,抑制炎症反应.

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