目的 观察在体外培养条件下,慢病毒载体介导的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因转染对兔骨髓基质干细胞(BMSCs)生物学特性的影响.方法 采用密度梯度离心法及贴壁筛选法获取BMSCs;利用慢病毒载体将bFGF基因转染到BMSCs中,根据转染条件分为bFGF转染组、空病毒组、未转染组,转染后分别对3组细胞的形态、bFGF mRNA及蛋白表达、细胞增殖情况、细胞周期及碱性磷酸酶(ALP)活性进行观察.结果 采用密度梯度离心法和贴壁筛选法,成功获得高纯度的BMSCs.载有bFGF基因的慢病毒转染BMSCs后,细胞形态无明显变化,而bFGF mRNA与蛋白表达均明显增强、细胞增殖曲线上移、增殖期细胞比例增大、ALP活性明显增高,与空病毒组及未转染组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 利用慢病毒载体将兔bFGF基因导入体外培养的BMSCs,目的基因获得稳定表达,并且自身过表达的bFGF可以促进BMSCs的增殖与成骨分化.
作者:张槐;彭吾训;刘钢;张健;张飞;王健波;赵胤;李青
来源:天津医药 2018 年 46卷 2期