目的 探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)在醛固酮(ALDO)诱导大鼠肾小管上皮细胞自噬中的作用.方法 取对数生长期的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E),分为Control组、ALDO组(10 nmol/L)、HMGB1抗体组(1 mg/L)、IgG组(1 mg/L)和ALDO+HMGB1抗体组(1 mg/L HMGB1抗体预处理1 h,再加入10 nmol/L ALDO刺激24 h)和阳性对照组(Rosup,100μmol/L),处理24 h后利用荧光探针DCFH-DA标记后使用流式细胞仪检测NRK-52E细胞内活性氧(ROS)水平的变化.另外,将培养的NRK-52E细胞分为Control组、ALDO组(10 nmol/L)、N-乙酰半胱氨酸组(NAC,50μmol/L)和NAC+ALDO组(50μmol/L NAC预处理1 h,再加入10 nmol/L ALDO),处理24 h后Western blot法检测白细胞介素(IL)-1β蛋白的表达水平.观察10 nmol/L ALDO刺激24 h后,HMGB1蛋白表达的变化.最后,予以1 mg/L HMGB1抗体预处理(1 mg/L HMGB1抗体处理1 h后,再加入10 nmol/L ALDO刺激24 h),Western blot法检测LC3-Ⅱ、Beclin-1和p62蛋白的表达水平.结果 流式细胞仪检测结果显示,与Control组相比,ALDO组NRK-52E细胞内ROS的产生明显增加(P<0.05);与ALDO组相比,ALDO+HMGB1抗体组细胞内ROS的水平显著下降(P<0.05).Western blot结果显示,与Control组相比,ALDO组IL-1β、HMGB1、LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白的表达上

作者：毛楠；林定彪；马欣；陈鸿禧；周琬秋；王少清

来源：天津医药 2020 年 48卷 4期