目的：观察顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶（calpain ）表达的影响，探讨顺铂致耳蜗毛细胞凋亡的机制。方法取出生后3 d的昆明小鼠300只（600耳），分离出耳蜗基底膜600条，体外培养24 h后，随机分为对照组和4、8、16μg／ml顺铂组，每组150条；对照组加入2ml新鲜培养基，顺铂组分别加入2 ml含不同浓度顺铂（4、8、16μg／ml）的新鲜培养基，再继续培养24 h后，应用Hoechst 33258荧光染色观察耳蜗毛细胞凋亡情况，并应用免疫荧光染色和免疫印迹（Western blot）技术检测calpain 1（μ－calpain）和calpain 2（m －calpain）在耳蜗毛细胞的表达。结果4、8、16μg／m l顺铂组耳蜗毛细胞凋亡率分别为15．63％±0．20％、38．40％±2．64％和64．24％±0．05％，均高于对照组（5．55％±0．12％），呈现明显的量效关系；不同浓度顺铂组μ－calpain和m －cal‐pain的表达均较对照组明显增强（ P＜0．01），且m －calpain的表达随顺铂浓度的增高而明显增强（ P＜0．01）。结论顺铂可通过calpain通路诱导小鼠耳蜗毛细胞凋亡，从而发挥毒性效应。
作者：张立伟；刘芳芳；于利；王爱梅
来源：听力学及言语疾病杂志 2016 年 24卷 2期
