目的 观察酸性成纤维细胞生长因子(acid fibroblast growth factor,aFGF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)体外定向诱导分化作用及诱导后肝细胞标志物的表达水平.方法 体外培养小鼠ESC使其发育成拟胚体,然后加入aFGF、HGF诱导ESC定向分化成肝细胞.收集培养上清液,RIA法测定甲胎蛋白(alpha fetopro-tein,AFP)、白蛋白(albumin,A LB)浓度.PCR和免疫印迹法检测ALB、细胞角蛋白8(CK8)以及细胞角蛋白18(CK18)在细胞内mRNA和蛋白表达水平.结果 ESC培养5d后发育成为拟胚体,加入不同浓度aFGF继续培养,5d后AFP浓度降低,ALB浓度升高,与对照组相比有显著性差异.细胞内ALB、CK8及CK18表达水平明显升高.一次诱导后加入HGF,继续诱导5d,上清液中AFP浓度降低,ALB浓度升高,具有浓度依赖性.ALB、CK8及CK18在细胞内表达升高.结论 体外培养小鼠ESC,加入aFGF、HGF后可诱导其向肝细胞定向分化.肝细胞标志物AFP水平明显降低,ALB、CK8以及CK18表达水平明显升高.
作者：应佳丽；王雪玲；范丽娇；张少艳
来源：胃肠病学和肝病学杂志 2014 年 23卷 11期
