目的 探究微小RNA-29b(miR-29b)靶向卷曲蛋白 6(FZD6)参与急性髓系白血病(AML)细胞柔红霉素(DNR)耐药的分子机制.方法 CCK-8检测AML细胞系在不同DNR浓度下的生存能力,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测AML细胞系中miR-29b的表达.选取THP-1细胞为研究对象,分为Control组(正常培养)、miR-NC mimics组(转染miR-NC mimics)、miR-29b mimics 组(转染 miR-29b mimics)、miR-29b mimics+pcDNA 组(转染 miR-29b mimics 和 pcDNA)、miR-29b mimics+pcDNA-FZD6 组(转染miR-29b mimics和pcDNA-FZD6),转染 24 h后使用 10 mM DNR处理培养24 h.qRT-PCR和免疫印迹(Western blot)检测各组DNR处理的THP-1细胞中miR-29b和FZD6 表达水平.生物信息学和双荧光素酶报告基因预测并检测miR-29b和FZD6 靶向关系.CCK-8、Edu法和流式细胞术分别检测DNR处理的各组THP-1 细胞增殖和凋亡情况.结果 AML细胞系对DNR的耐药性是呈浓度依赖性的,qRT-PCR结果显示,miR-29b在AML细胞系THP-1(1.00±0.05)、KG-1(1.87±0.16)、HL-60(2.96±0.21)及Kasumi-1(3.73±0.29)中的表达逐渐增高(P<0.05).双荧光素酶报告基因检测、qRT-PCR及Western blot证明miR-29b可直接负靶向FZD6(0.32±0.04,0.37±0.05,0.48±0.06,P<0.05).miR-29b过表达可使AML细胞对

作者：赖思含；何莹；易海

来源：武警医学 2023 年 34卷 4期