目的:研究乳腺癌转移与未转移病人血清外泌体内差异蛋白表达情况.方法:收集乳腺癌淋巴结转移或远处转移 (metastatsis, M+) 病人血清25例, 乳腺癌淋巴结未转移且未远处转移M-病人血清25例.应用EIQ3试剂盒分离血清外泌体.挑选4例M+及4例M-病人血清, 通过NTA粒径分析、CD9和CD63表面标志物鉴定外泌体.通过蛋白质质谱分析及生物信息学分析, 筛选乳腺癌病人血清外泌体差异表达的蛋白质, 并进行蛋白质印迹验证.结果:血清提取物粒径在20～200 nm, CD9和CD63表达均呈阳性, 符合外泌体特征.两组外泌体经质谱共鉴定出301种蛋白质, 筛选出16种差异蛋白, 其中的玻连蛋白 (vitronectin, VN) 及人组织激肽释放酶结合蛋白 (kallistatin, KAL) 在M+组表达上调, 遮蔽蛋白 (obscurin, OBSCN) 则在M-组下调.通过蛋白质印迹验证, 3种差异蛋白质结果与质谱结果一致.结论:乳腺癌病人血清中存在外泌体, 其中外泌体来源蛋白VN、KAL及OBSCN有望作为预测乳腺癌转移的生物标志物.
作者：曹丽辰；田宝星；瞿飞麟；张庆华；郭善禹
来源：外科理论与实践 2019 年 24卷 2期
