[目的]白细胞介素-18通过激活Thl细胞和NK细胞产生IFN-γ而发挥关键的免疫调节作用.人和小鼠分泌的白细胞介素-18结合蛋白(IL-18BP)可以拮抗其活性.推测在鸡痘病毒基因组中也含有IL-18BP基因的同源物,对其表达的蛋白质进行了活性鉴定,为拮抗IL-18主导的疾病提供理论依据.[方法]根据鸡痘疫苗病毒的基因组序列设计特异性引物,使用PCR方法从中分离cIL-18BP基因,将该基因克隆到酵母表达载体pPICZaA中,甲醇诱导后在酵母GS115中进行表达.对表达的重组蛋白进行了活性鉴定.[结果]从鸡痘病毒中克隆到cIL-18BP基因,SDS-PAGE鉴定了该基因在酵母系统中的高效表达.ELISA检测表明纯化后的cIL-18BP与重组鸡(c)IL-18发生特异性结合;通过测定IFN-γ的浓度,表明该蛋白具有拮抗IL-18刺激外周血单核细胞(PBMCs)和MSBI细胞分泌IFN-γ的活性.[结论]实验表明,cIL-18 BP通过抑制cIL-18刺激相关免疫细胞分泌IFN-γ而发挥对IL-18的拮抗作用,敲除该基因可能有助于研制更安全和高效的鸡痘疫苗.
作者：刘文强；刘桂芹；秦绪岭；王桂英
来源：微生物学报 2010 年 50卷 4期
