[目的]本研究旨在通过驯化提高噬菌体的裂解能力并降低其宿主菌耐受性产生的速度,从而提高对重要病原菌-碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKp)的杀菌效果.[方法]以临床 CRKp 菌株 Kp2092 为宿主菌,利用双层琼脂平板法从污水中分离噬菌体并分析其裂解谱;对其中的广谱强裂解性噬菌体通过透射电镜观察其形态特征并进行全基因组测序;通过噬菌体-宿主连续培养进行噬菌体驯化,并比较驯化前后噬菌体生物学特性的差异.[结果]分离得到的 9 株肺炎克雷伯菌噬菌体中,噬菌体P55anc裂解能力强且裂解谱广,透射电镜观察发现其为短尾噬菌体.P55anc基因组全长 40 301 bp,包含 51 个编码序列,其中 27个具有已知功能,主要涉及核酸代谢、噬菌体结构蛋白、DNA 包装和细胞裂解等.噬菌体 P55anc经 9 d的驯化后,得到 3 株驯化噬菌体.驯化后噬菌体杀菌能力增强,主要表现为细菌生长曲线显著下降、噬菌体暴发量增多、裂解谱扩大,且宿主菌对其产生抗性的概率显著降低.与此同时,驯化后的噬菌体在热处理、紫外暴露以及血清等环境下保持较好的稳定性.[结论]利用噬菌体-宿主连续培养的方法可对噬菌体进行驯化和筛选,驯化后的噬菌体杀菌效果更强,且在不同压力处理下的稳定性良好,而细菌产生噬菌体
作者：王梦竹；赵梦诗；马晓丹；曾玲霜；杨秋娥；邓辉
来源：微生物学报 2024 年 64卷 1期
