目的:为制备血管化胰岛,分离、培养脂肪来源干细胞(adipose derived stem cells ,ADSCs ),观察细胞共培养条件下,ADSCs对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell ,HUVECs)增殖及成血管化功能的促进作用并探讨其机制。方法采用胶原酶消化法分别原代培养获得ADSCs与HUVECs ,细胞形态学、免疫荧光或多向诱导分化鉴定,建立 HUVECs与ADSCs接触式及间接共培养体系,设立 HUVECs单独培养为对照组,比较两组成血管化功能、HUVECs增殖状况及上清液血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor ,VEGF)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor ,b‐FGF)浓度。结果通过原代培养成功获得ADSCs与 HUVECs ;第3代AD‐SCs呈均一的长梭形纤维细胞样形态,免疫荧光检测见CD44/CD49d(+)、CD31/CD34(-),并具有多向分化功能;第2代 HUVECs免疫荧光检测示vWF/CD31(+)。于Matrigel内接触式共培养4 h ,ADSCs+ HUVECs组血管密度高于 HUVECs组;间接共培养时,HUVECs生长曲线于 ADSCs+ HUVECs 组上移,在对数生长期的第3、4、5天, ADSCs+ HUVECs组HUVECs计数为(4.52±0.31)×104、(7.18±0.45)×104、(8.23±0.36)×104,大于单独 HU‐VEC
作者:焦自钊;薛武军;田晓辉;李杨;郑瑾
来源:西安交通大学学报(医学版) 2016 年 37卷 4期