目的 研究miR-17对冠状动脉疾病(CAD)中血管平滑肌细胞(VSMCs)的潜在作用机制.方法 RT-qPCR检测CAD患者血清和VSMCs中miR-17和胰岛素样生长因子1(IGF-1)的mRNA表达,通过CCK-8和克隆形成实验测定VSMCs的增殖情况;通过生物信息学和荧光素酶报告基因检测系统分析miR-17的潜在靶标.结果 RT-qPCR结果显示,与对照组相比,CAD患者血清和VSMCs中miR-17的mRNA表达均显著上调(P<0.01).CCK-8和克隆形成测定结果显示,与对照组相比,miR-17过表达组VSMCs细胞增殖和克隆形成数均显著升高(P<0.01);miR-17低表达组均显著降低(P<0.01).生物信息学分析结果显示,IGF-1的3'-UTR中具有miR-17的结合位点.荧光素酶报告基因测定结果显示,与野生型IGF-1质粒和miR-17模拟物共转染的VSMCs的荧光素酶活性升高(P<0.001),而转染突变型IGF-1质粒和miR-17模拟物的VSMCs的荧光素酶活性无改变.与对照组相比,过表达miR-17组VSMCs中的IGF-1表达上调(P<0.01);与对照组相比,IGF-1过表达组VSMCs细胞增殖和克隆形成数均显著升高(P<0.05).结论 miR-17通过靶向IGF-1促进VSMCs增殖,表明miR-17可作为CAD的预测生物标志物,IGF-1可能是潜在的治疗靶点.
作者:金爱萍;李书琳;张倩榕;李冰
来源:西安交通大学学报(医学版) 2021 年 42卷 4期