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目的:将分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因(sFv-TNF-α)克隆至逆转录病毒载体pLXSN,包装并筛选具有高滴度感染性重组病毒产生细胞系.方法:用平-粘末端连接方法将sFv-TNF-α克隆至pLXSN, 磷酸钙共沉淀法转染PA317包装细胞并测定病毒滴度, 用PCR及免疫组化方法分析鉴定重组逆转录病毒细胞系.结果:成功构建了表达载体pLXSN-sFv-TNF-α,筛选出一株 cfu＞1×109*L-1的感染性重组病毒产生细胞系C22.结论:外源基因整合到转染细胞DNA中并表达,证实了重组病毒的活性及其转导靶细胞的可行性.
作者：程虹；刘彦仿；张惠中；沈万安
来源：西北国防医学杂志 2003 年 24卷 2期
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