目的:通过第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导小鼠胰岛β细胞凋亡,研究氧化损伤对内质网应激JNK凋亡通路相关分子表达的影响.方法:将不同浓度t-BHP(0~400 μmol/L)分别加入胰岛B细胞株MIN6细胞中,于不同时间(0~8 h)收集细胞悬液进行相关检测.CCK-8法检测细胞增殖活力;Annexin-V-PI流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率及坏死率;Caspase-3检测试剂盒测定easpase-3活性;Western blot检测内质网应激相关分子IRE1α,JNK,P-JNK,Caspase-3蛋白的表达.结果:随t-BHP浓度的增高,①MIN6细胞的存活率降低;②t. BHP以浓度≥25μmol/L作用≥1 h时,Caspase-3活性有明显变化(P<0. 05);③随t-BHP浓度增大、作用时间延长,内质网应激跨膜蛋白IRE1α表达逐渐减少,P-JNK、活性easpase-3表达明显增多.结论:①t-BHP引发细胞凋亡坏死呈一定的时效和量效关系;②持续t-BHP氧化损伤可诱导MIN6细胞发生内质网应激并发生凋亡;③内质网应激凋亡通路相关分子表达在细胞凋亡过程中有浓度和时间依赖性.
作者：陈闻佳；刘小莺；王林曦；王燕萍；刘晓红；刘礼斌
来源：细胞与分子免疫学杂志 2011 年 27卷 3期
