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目的 原核表达并纯化小鼠源性含1型血小板结合蛋白基序的去整合素样金属蛋白酶2(ADAMTS2)蛋白的C段(1109-1213),制备兔抗ADAMTS2多克隆抗体.方法 以重组质粒pGEX-6p-1-ADAMTS2 (1109-1213)转化大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白表达,通过亲和纯化,并且经质谱鉴定;以表达的目的蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗ADAMTS2的多克隆抗体.ELISA检测抗体效价,Western blot法鉴定抗体特异性.结果 在大肠杆菌中表达出目的蛋白ADAMTS2,纯化后经质谱鉴定并免疫新西兰大白兔,成功获得抗血清.血清效价达到1:160000以上,且具有良好的特异性.结论 成功制备出效价高、特异性好的兔抗ADAMTS2抗体.

作者:付俊;缪时英;王琳芳

来源:细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 3期

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作者:
付俊;缪时英;王琳芳
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 3期
标签:
ADAMTS2 原核表达 多克隆抗体 ADAMTS2 prokaryotic expression polyclonal antibody
目的 原核表达并纯化小鼠源性含1型血小板结合蛋白基序的去整合素样金属蛋白酶2(ADAMTS2)蛋白的C段(1109-1213),制备兔抗ADAMTS2多克隆抗体.方法 以重组质粒pGEX-6p-1-ADAMTS2 (1109-1213)转化大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白表达,通过亲和纯化,并且经质谱鉴定;以表达的目的蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗ADAMTS2的多克隆抗体.ELISA检测抗体效价,Western blot法鉴定抗体特异性.结果 在大肠杆菌中表达出目的蛋白ADAMTS2,纯化后经质谱鉴定并免疫新西兰大白兔,成功获得抗血清.血清效价达到1:160000以上,且具有良好的特异性.结论 成功制备出效价高、特异性好的兔抗ADAMTS2抗体.

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