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目的 检测白细胞介素33(IL-33)对小鼠骨髓来源肥大细胞(BMMC)脱颗粒及细胞因子分泌的影响.方法 原代培养小鼠BMMC,用(0、10、20、50) ng/mL的IL-33进行刺激,分别收集细胞及培养上清.Western blot法检测c-Kit表达水平;于收集的各IL-23处理组培养上清中分别加入β己糖胺酶底物,通过底物与β己糖胺酶反应所得产物吸光度值,间接测定上清中β己糖胺酶含量.ELISA测定细胞上清液中组织胺含量评估肥大细胞脱颗粒情况;ELISA检测培养细胞上清液中IL-1β、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平.结果 IL-33促进BMMC的c-Kit表达.不同剂量的IL-33作用于BMMC 30 min后,可浓度依赖性地促进β己糖胺酶及组织胺的释放.IL-33作用于BMMC 24 h可促进IL-1β分泌,以50 ng/mL IL-33时作用最显著;IL-33可促进IL-6分泌,以50 ng/mL浓度时作用最显著;IL-33可促进TNF-α分泌,以20 ng/mL浓度时作用最显著.结论 IL-33可刺激BMMC脱颗粒,并分泌IL-1β、IL-6及TNF-α.

作者:周佳;张晨;尚靖

来源:细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 4期

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作者:
周佳;张晨;尚靖
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 4期
标签:
肥大细胞 白细胞介素33(IL-33) 脱颗粒 细胞因子 mast cell IL-33 degranulation cytokines
目的 检测白细胞介素33(IL-33)对小鼠骨髓来源肥大细胞(BMMC)脱颗粒及细胞因子分泌的影响.方法 原代培养小鼠BMMC,用(0、10、20、50) ng/mL的IL-33进行刺激,分别收集细胞及培养上清.Western blot法检测c-Kit表达水平;于收集的各IL-23处理组培养上清中分别加入β己糖胺酶底物,通过底物与β己糖胺酶反应所得产物吸光度值,间接测定上清中β己糖胺酶含量.ELISA测定细胞上清液中组织胺含量评估肥大细胞脱颗粒情况;ELISA检测培养细胞上清液中IL-1β、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平.结果 IL-33促进BMMC的c-Kit表达.不同剂量的IL-33作用于BMMC 30 min后,可浓度依赖性地促进β己糖胺酶及组织胺的释放.IL-33作用于BMMC 24 h可促进IL-1β分泌,以50 ng/mL IL-33时作用最显著;IL-33可促进IL-6分泌,以50 ng/mL浓度时作用最显著;IL-33可促进TNF-α分泌,以20 ng/mL浓度时作用最显著.结论 IL-33可刺激BMMC脱颗粒,并分泌IL-1β、IL-6及TNF-α.

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