目的 通过RNA靶向干扰降低人胃癌BGC823细胞中锌指E盒增强子结合蛋白1(ZEB1)基因表达,观察ZEB1低表达对胃癌BGC823细胞的侵袭、迁移及增殖能力的影响,并检测相关基因IncRNA HOTAIR、上皮钙黏素(E-cadherin)表达情况.方法 用载体构建针对人ZEB1基因表达的干扰质粒shZEB1,脂质体转染胃癌BGC823细胞后,经G418及有限稀释法筛选稳定转染细胞株.通过实时定量PCR和Western blot法检测BGC823细胞ZEB1 mRNA和蛋白水平,MTT法检测其增殖能力,TranswellTM小室侵袭试验检测转染细胞侵袭能力、划痕试验检测细胞迁移能力,实时定量PCR检测IncRNA HOTAIR、E-cadherinmRNA水平.结果 成功构建干扰质粒shZEB1,敲低BGC823细胞ZEB1水平后,BGC823细胞的增殖、侵袭和迁移能力降低、lncRNAHOTAIR水平降低、而E-cadherin表达增高.结论 靶向降低BGC823胃癌细胞ZEB1的水平,可降低lncRNA HOTAIR水平及细胞增殖、侵袭、迁移力.
作者:陈登宇;褚一凡;郑庆委;徐志本;周平;李胜
来源:细胞与分子免疫学杂志 2017 年 33卷 8期