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目的 制备兔抗人乳酸脱氢酶C4(LDHC4)的多克隆抗体.方法 采用PCR点突变LDHC基因,并将该基因构建到pET-28a载体上,形成pET-28a-LDHC重组表达载体、将重组载体转化至大肠杆菌表达宿主BL21(DE3),诱导表达获得重组人LDHC4蛋白,将重组蛋白作为抗原免疫新西兰兔,3次加强免疫后得到抗血清,采用ELISA检测抗血清效价,采用Western blot法检测抗血清的特异性,采用免疫组织化学法检测人三阴性乳腺癌组织中LDHC4的表达.结果 获得了特异性的兔抗人LDHC4多克隆抗体,抗体效价达1∶51 200,该抗体可用于Western blot法和免疫组织化学法.结论 成功制备了特异性兔抗人LDHC4多克隆抗体.

作者:黄阿秀;邓彩云;杨思雨;张庆莲

来源:细胞与分子免疫学杂志 2023 年 39卷 12期

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作者:
黄阿秀;邓彩云;杨思雨;张庆莲
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2023 年 39卷 12期
标签:
乳酸脱氢酶C4(LDHC4) 重组蛋白 多克隆抗体 lactate dehydrogenase C4(LDHC4) recombinant protein polyclonal antibody
目的 制备兔抗人乳酸脱氢酶C4(LDHC4)的多克隆抗体.方法 采用PCR点突变LDHC基因,并将该基因构建到pET-28a载体上,形成pET-28a-LDHC重组表达载体、将重组载体转化至大肠杆菌表达宿主BL21(DE3),诱导表达获得重组人LDHC4蛋白,将重组蛋白作为抗原免疫新西兰兔,3次加强免疫后得到抗血清,采用ELISA检测抗血清效价,采用Western blot法检测抗血清的特异性,采用免疫组织化学法检测人三阴性乳腺癌组织中LDHC4的表达.结果 获得了特异性的兔抗人LDHC4多克隆抗体,抗体效价达1∶51 200,该抗体可用于Western blot法和免疫组织化学法.结论 成功制备了特异性兔抗人LDHC4多克隆抗体.

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