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目的 构建表达mIL-18基因的腺病毒载体,并转染大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs),观察其在rBMSCs中的表达,为脑胶质瘤的基因治疗实验研究奠定基础.方法 mIL-18基因亚克隆于穿梭质粒pAdtrackCMV上,构建的pAdtrackCMV-mIL-18线性化后转化已含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,挑选同源重组质粒,线性化后HEK293细胞包装,CsCI纯化.体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞免疫表型；然后转染rBMSCs,通过荧光显微镜、RT-PCR、ELISA等方法检测mIL-18表达.结果 成功构建了绿色荧光蛋白标记的腺病毒Ad-mIL-18,并在rBMSCs中高效表达.结论 pAdEasy-1是基因转染的高效系统,腺病毒Ad- mIL-18转染的rBMSCs可以作为脑肿瘤基因治疗研究的种子细胞.
作者：许刚；郭燕舞；徐如祥；姜晓丹
来源：西部医学 2012 年 24卷 6期
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