目的:观察体外成骨诱导培养液条件下骨髓基质干细胞与细胞支架β-磷酸三钙体外复合培养后的成骨活性,以验证兔骨髓基质干细胞在体外向成骨细胞转化的能力,并进行对照比较.方法:实验于2003-10/2004-02在解放军第二军医大学长征医院骨科实验室完成.取健康成年新西兰大白兔7只,将抽取的骨髓置于加入地塞米松、β-甘油磷酸钠及维生素C的DMEM标准培养液中培养.对获得的兔骨髓基质干细胞以倒置显微镜、透射电镜、碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色等手段进行生长状态观察及生物学特性鉴定.然后将骨髓基质干细胞与β-磷酸三钙体外复合培养1周后自体回植兔肌肉内,分别在4周和8周后取材,观察其成骨能力以组织学方法检测,并与未复合的β-磷酸三钙的细胞做自身对照比较.结果:实验选取的7只兔全部进入结果分析.①细胞的生长状况及形态特征:细胞全骨髓法培养24～48 h,细胞开始贴壁,呈短梭形,贴壁细胞呈成纤维细胞集落方式生长.细胞培养5～7d,细胞集落生长逐渐密集,细胞体积逐渐增大,向长梭形转变,部分细胞呈多角形.②细胞生长曲线:传至第3代细胞,1～3 d细胞增殖缓慢,为潜伏期,3～5 d后细胞大量扩增,6 d后细胞达到顶点进入平台期.第1,2,4代细胞的生长曲线基本与第3代相似.③细胞贴壁率:各代细胞的贴壁率未见明显差
作者：许卫兵；吕刚；黄涛；滕红林；卢建熙；贾连顺；卢旭华；顾宇彤；杨建东
来源：中国临床康复 2005 年 9卷 22期
