目的:观察人骨髓间充质干细胞诱导的成骨细胞与珊瑚羟基磷灰石的相容性及碱性成纤维细胞生长因子的作用.方法:实验于2003-02/2005-10在大连医科大学附属第一医院中心实验室及上海第二医科大学完成.实验材料:①可吸收性珊瑚羟基磷灰石.②人骨髓间充质干细胞:取自单纯性骨囊肿行自体骨髓注射治疗的患者(年龄10~16岁,平均14.5岁),患者均知情同意.实验分组:使用含地塞米松、β甘油磷酸钠和抗坏血酸的条件培养基诱导骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞,与珊瑚羟基磷灰石复合培养,分为实验组(RPMI1640完全培养液+成骨细胞+可吸收性珊瑚羟基磷灰石),促增殖组(完全培养液+成骨细胞+可吸收性珊瑚羟基磷灰石+10μg/L碱性成纤维细胞生长因子),正常培养组(完全培养液+同等数量的成骨细胞).实验评估:①采用扫描电镜观察成骨细胞与可吸收性珊瑚羟基磷灰石复合培养6 h,1,3,7 d时细胞形态.②成骨细胞附着于材料表面后生长增殖特性:于接种后24 h,各组均取6孔细胞用胰蛋白酶消化贴壁细胞,包括材料上贴附的细胞,计数孔内细胞数及平均细胞数,绘制细胞生长曲线.③成骨细胞分泌碱性磷酸酶活性的测定:于接种后1,3,5,7 d采用酶联免疫监测仪测410 nm波长的吸光度值,计算每1 000个细胞的吸光度值.结果:①成骨细胞与可吸收性珊瑚羟基磷
作者:张德强;汤欣;张卫国
来源:中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 18期