背景:富血小板血浆中的多种生长因子及带血管筋膜是否具有促进骨再生及血管化作用尚在争论之中.目的:拟从组织影像学角度评价富血小板血浆及带血管筋膜对骨髓基质干细胞,脱钙骨基质复合的组织工程骨血管化作用效果.设计、时间及地点:单一样本观察及动物同体对照实验,于2004-10/2007-11在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成.材料:11-12月龄健康杂种犬12只,体质量20-25kg,雌雄各半.方法:①采用密度梯度离心法从犬骨髓中分离骨髓基质干细胞,体外贴擘培养扩增、成骨诱导培养.取杂种犬的股骨制备脱钙骨基质,并与骨髓基质干细胞复合.②将每只犬的背部分为4个区,A,B区,植入加富血小板血浆的骨髓摹质干细胞/脱钙骨基质复合体,C,D区,仅植入骨髓基质干细胞/脱钙骨基质复合体.A,C区植入物用背阔肌带血管肌筋膜包裹;B,D区植入物用背部不带血管的浅筋膜包裹.分别在4,8,12周各取4只,雌雄各半,麻醉后处死取标本.主要观察指标:①采用倒置相筹显微镜观察骨髓基质干细胞形态,四甲基偶氮唑盐法测定细胞生长曲线.②行改良钙钴法碱性磷酸酶染色,VonKossa法、茜索红法,钙结节染色观察诱导成骨细胞形态特征.③应用倒置相差显微镜、扫描电镜观察复合体的结构.④行大体标本、X射线数字影像及组织学观察评价.结果:①诱导成骨分化
作者:陈涛;李宁毅
来源:中国组织工程研究与临床康复 2008 年 12卷 46期