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背景:有研究表明乙醇可诱导骨髓间充质干细胞凋亡并引起成骨细胞和破骨细胞数量减少,但乙醇对骨髓间充质干细胞凋亡的影响以及作用机制目前尚不十分清楚.目的:观察乙醇对大鼠骨髓间充质干细胞凋亡、线粒体功能的影响及bcl-2、Caspase-3 表达的变化.方法:应用全骨髓培养法分离培养SD大鼠骨髓间质干细胞,置于0,100,200,300,400,500,600,700,800,900 mmol/L乙醇中作用24 h,MTT 法进行细胞毒性药物实验;置于0,100,200,300,400,500 mmol/L 乙醇中作用6,12,24 h,AnnexinV/ PI 双标记法流式细胞仪检测细胞凋亡和线粒体膜电位变化情况;置于0,427 mmol/L 乙醇中作用24 h,RT-PCR法检测与凋亡有关的基因bcl-2 和Caspase-3 mRNA 表达水平.结果与结论:MTT 检测结果显示427 mmol/L 是乙醇对大鼠骨髓间充质干细胞生长的半数抑制浓度;AnnexinV/ PI 检测结果表明,与0 mmol/L 组比较,随作用时间的延长与乙醇浓度的增加,骨髓间充质干细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的破坏水平明显升高(P < 0.05).与0 mmol/L 组比较,乙醇作用24 h 后427 mmol/L 组bcl-2 mRNA 表达水平下降,Caspase-3 mRNA表达水平增加(P < 0.05).说明乙醇能诱导大鼠骨髓间充质干细胞凋亡,凋亡的发生可能与线粒体膜电位破坏、线粒体功能障碍、bcl-2 和Caspase-3 激

作者:马爱国;赵劲民;苏伟;李晓峰;范锲;崔向荣

来源:中国组织工程研究与临床康复 2011 年 15卷 27期

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作者:
马爱国;赵劲民;苏伟;李晓峰;范锲;崔向荣
来源:
中国组织工程研究与临床康复 2011 年 15卷 27期
标签:
乙醇 骨髓间充质干细胞 凋亡 AnnexinV/PI 双标记法 线粒体膜电位 大鼠 RT-PCR bcl-2 Caspase-3
背景:有研究表明乙醇可诱导骨髓间充质干细胞凋亡并引起成骨细胞和破骨细胞数量减少,但乙醇对骨髓间充质干细胞凋亡的影响以及作用机制目前尚不十分清楚.目的:观察乙醇对大鼠骨髓间充质干细胞凋亡、线粒体功能的影响及bcl-2、Caspase-3 表达的变化.方法:应用全骨髓培养法分离培养SD大鼠骨髓间质干细胞,置于0,100,200,300,400,500,600,700,800,900 mmol/L乙醇中作用24 h,MTT 法进行细胞毒性药物实验;置于0,100,200,300,400,500 mmol/L 乙醇中作用6,12,24 h,AnnexinV/ PI 双标记法流式细胞仪检测细胞凋亡和线粒体膜电位变化情况;置于0,427 mmol/L 乙醇中作用24 h,RT-PCR法检测与凋亡有关的基因bcl-2 和Caspase-3 mRNA 表达水平.结果与结论:MTT 检测结果显示427 mmol/L 是乙醇对大鼠骨髓间充质干细胞生长的半数抑制浓度;AnnexinV/ PI 检测结果表明,与0 mmol/L 组比较,随作用时间的延长与乙醇浓度的增加,骨髓间充质干细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的破坏水平明显升高(P < 0.05).与0 mmol/L 组比较,乙醇作用24 h 后427 mmol/L 组bcl-2 mRNA 表达水平下降,Caspase-3 mRNA表达水平增加(P < 0.05).说明乙醇能诱导大鼠骨髓间充质干细胞凋亡,凋亡的发生可能与线粒体膜电位破坏、线粒体功能障碍、bcl-2 和Caspase-3 激

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