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背景:新近发现 CD11clowCD45RBhigh 调节性树突状细胞在参与免疫负向调控机制和临床治疗上有潜在的意义.目前对于健康人骨髓来源的调节性树突状细胞的体外诱导培养及鉴定的研究较少.目的:体外培养正常人骨髓来源的具有 CD11clowCD45RBhigh 表型的调节性树突状细胞,从细胞形态、免疫表型、吞噬功能及刺激 T 淋巴细胞增殖能力等方面对其进行鉴定.方法:分离正常人骨髓单个核细胞分别在不同的培养体系中进行体外诱导培养,实验分3组:①调节性树突状细胞组,在含粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素10,转化生长因子β1的1640培养基中培养7 d 后,用脂多糖刺激24 h.②未成熟树突状细胞组,用含粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素4的1640培养基培养8 d③成熟树突状细胞组,用含粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素4的1640培养基培养7 d 后,予脂多糖刺激24 h,使其成熟.光镜和扫描电镜观察树突状细胞的形态,流式细胞仪检测其免疫表型以及吞噬能力,CCK-8法检测其刺激异基因淋巴细胞增殖能力.结果与结论:①人骨髓源单个核细胞在联合应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素10,转化生长因子β1培养8 d 后获得的细胞具有调节性树突状细胞的典型特征和免疫表型,说明该实验建立的培养调节性树突状细胞的方法

作者:刘苍春;黄一虹;冯洒然;谷红红;曾令宇;李德鹏;徐开林

来源:中国组织工程研究 2012 年 53期

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刘苍春;黄一虹;冯洒然;谷红红;曾令宇;李德鹏;徐开林
来源:
中国组织工程研究 2012 年 53期
标签:
树突状细胞 调节性 骨髓单个核细胞 细胞因子 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 白细胞介素 10 转化生长因子 β1 免疫耐受 体外培养 鉴定
背景:新近发现 CD11clowCD45RBhigh 调节性树突状细胞在参与免疫负向调控机制和临床治疗上有潜在的意义.目前对于健康人骨髓来源的调节性树突状细胞的体外诱导培养及鉴定的研究较少.目的:体外培养正常人骨髓来源的具有 CD11clowCD45RBhigh 表型的调节性树突状细胞,从细胞形态、免疫表型、吞噬功能及刺激 T 淋巴细胞增殖能力等方面对其进行鉴定.方法:分离正常人骨髓单个核细胞分别在不同的培养体系中进行体外诱导培养,实验分3组:①调节性树突状细胞组,在含粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素10,转化生长因子β1的1640培养基中培养7 d 后,用脂多糖刺激24 h.②未成熟树突状细胞组,用含粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素4的1640培养基培养8 d③成熟树突状细胞组,用含粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素4的1640培养基培养7 d 后,予脂多糖刺激24 h,使其成熟.光镜和扫描电镜观察树突状细胞的形态,流式细胞仪检测其免疫表型以及吞噬能力,CCK-8法检测其刺激异基因淋巴细胞增殖能力.结果与结论:①人骨髓源单个核细胞在联合应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素10,转化生长因子β1培养8 d 后获得的细胞具有调节性树突状细胞的典型特征和免疫表型,说明该实验建立的培养调节性树突状细胞的方法

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