背景：脂肪分离可获得大量的间充质干细胞并成功向骨、软骨、脂肪、心肌等多个方向诱导分化。<br> 目的：建立成人脂肪间充质干细胞体外分离培养、成骨分化方法，并探讨脂肪间充质干细胞作为骨组织工程的种子细胞的前景。<br> 方法：通过胶原酶消化法从成人脂肪中分离间充质干细胞，进行体外培养，流式细胞仪检测细胞表面标记物， CCK8检测细胞活性，成骨诱导液诱导干细胞向骨细胞分化，BCIP/NBT比色法染色检测碱性磷酸酶，茜素红染色检测钙结节形成，RT-PCR检测碱性磷酸酶，骨桥蛋白表达变化。<br> 结果与结论：利用脂肪抽吸液成功培养出脂肪间充质干细胞，且能稳定传代，增殖能力旺盛；流式细胞仪检测证实有特定的间充质干细胞表面标记物表达；成骨诱导脂肪间充质干细胞后呈典型的成骨细胞形态；碱性磷酸酶染色阳性，茜素红染色后可见钙结节形成，成骨诱导培养0，3，7，14，21，28 d，RT-PCR定量检测结果证实碱性磷酸酶、骨桥蛋白阳性表达。说明用酶消化法可以从人脂肪中分离得到脂肪间充质干细胞；脂肪间充质干细胞可向骨细胞诱导分化，阳性表达骨桥蛋白，碱性磷酸酶，是一种优良的骨组织工程的种子细胞。
作者：郭艳萍；陶常波；张爱君；李雪阳；沈才齐；李政道；金培生
来源：中国组织工程研究 2014 年 19期
