背景：体外实验提示LMP-1基因可提高骨质疏松性骨髓间充质干细胞LMP-1蛋白的表达。目的：用含有LIM矿化蛋白1基因的反转录病毒载体(RV-LMP-1-GFP)转染骨质疏松性SD大鼠骨髓间充质干细胞，检测其对骨质疏松性骨髓间充质干细胞LIM矿化蛋白表达的影响。方法：随机取雌性SD大鼠12只，采用双侧卵巢切除法建立骨质疏松性大鼠模型，另取6只大鼠仅切除卵巢周围等量脂肪组织，保留卵巢为假手术组。喂养2个月后取双侧股骨、胫骨、肱骨分离培养其骨髓间充质干细胞。均取3代培养细胞随机分为去势组、LMP-1转染组(转染LMP-1基因)和假手术组。分别行RT-PCR及Western-Blot检测各组细胞LIM矿化蛋白1 mRNA和蛋白的表达。结果与结论：培养出骨质疏松性SD大鼠骨髓间充质干细胞，转染后倒置荧光显微镜下可见绿色荧光表达；3组细胞均可在基因及蛋白水平表达 LIM 矿化蛋白1。与假手术组及去势组比较，LMP-1基因转染组的LIM-1mRNA和蛋白的表达均升高显著(P<0.05)，假手术组与去势组之间差异无显著性意义(P>0.05)。成功实现重组 RV-LMP-1-GFP 基因在骨质疏松性 SD 大鼠骨髓间充质干细胞中 mRNA 和蛋白水平的表达，且LMP-1的表达水平显著提高。结果表明重组LMP-1基因成功导入骨质疏松性大鼠骨髓间充质干细胞基因组中，并使得LMP-1
作者：金夏生；王子江；向川
来源：中国组织工程研究 2014 年 23期
