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背景:对于骨缺损,通常需要通过骨组织或成骨材料的移植或充填进行修复。切取自体骨组织会给患者带来额外的损伤和继发畸形,为此,新一代的成骨材料研究迫在眉睫。<br>  目的:构建含人骨形成蛋白2质粒DNA的β-磷酸三钙/胶原支架材料,并观察其对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1分化的影响。<br>  方法:制备纳米级多孔β-磷酸三钙/胶原支架并负载含人骨形成蛋白2目的基因的质粒DNA形成基因修饰的支架材料。建立小鼠前成骨细胞细胞株MC3T3-E1与复合支架的体外培养体系。将其分为支架组和平皿组,再根据质粒的浓度每组再分为2个小组。复合培养后取样通过扫描电镜和光镜进行细胞形态学观察;诱导1,3,7,14 d行茜素红染色观察钙结节情况;实时荧光定量PCR检测细胞周期;诱导1,3,7,14 d观察成骨细胞相关基因Ⅰ型胶原αⅠ链基因、锌指结构转录因子、骨唾液酸蛋白的表达。<br>  结果与结论:①含人骨形成蛋白2为目的基因的质粒DNA修饰纳米β-磷酸三钙/Ⅰ型胶原溶液复合材料上细胞黏附数、分化数量及材料表面分布都高于单纯含人骨形成蛋白2为目的基因的质粒DNA(P<0.05);②通过用茜素红染色、实时荧光定量PCR检测,结果显示支架组对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1成骨能力的影响优于平皿组;③结果提示,负载人骨

作者:阮蔷;赵刚;郭睿;肖月;李超

来源:中国组织工程研究 2016 年 20卷 38期

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作者:
阮蔷;赵刚;郭睿;肖月;李超
来源:
中国组织工程研究 2016 年 20卷 38期
标签:
生物材料 骨生物材料 人骨形成蛋白2 β-磷酸三钙/胶原 分化 骨缺损 黑龙江省自然科学基金
背景:对于骨缺损,通常需要通过骨组织或成骨材料的移植或充填进行修复。切取自体骨组织会给患者带来额外的损伤和继发畸形,为此,新一代的成骨材料研究迫在眉睫。<br>  目的:构建含人骨形成蛋白2质粒DNA的β-磷酸三钙/胶原支架材料,并观察其对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1分化的影响。<br>  方法:制备纳米级多孔β-磷酸三钙/胶原支架并负载含人骨形成蛋白2目的基因的质粒DNA形成基因修饰的支架材料。建立小鼠前成骨细胞细胞株MC3T3-E1与复合支架的体外培养体系。将其分为支架组和平皿组,再根据质粒的浓度每组再分为2个小组。复合培养后取样通过扫描电镜和光镜进行细胞形态学观察;诱导1,3,7,14 d行茜素红染色观察钙结节情况;实时荧光定量PCR检测细胞周期;诱导1,3,7,14 d观察成骨细胞相关基因Ⅰ型胶原αⅠ链基因、锌指结构转录因子、骨唾液酸蛋白的表达。<br>  结果与结论:①含人骨形成蛋白2为目的基因的质粒DNA修饰纳米β-磷酸三钙/Ⅰ型胶原溶液复合材料上细胞黏附数、分化数量及材料表面分布都高于单纯含人骨形成蛋白2为目的基因的质粒DNA(P<0.05);②通过用茜素红染色、实时荧光定量PCR检测,结果显示支架组对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1成骨能力的影响优于平皿组;③结果提示,负载人骨

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