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背景:Runx2在成骨分化的信号途径中起核心作用,在诱导干细胞成骨分化及促进骨愈合方面具有重要的研究意义.目的:观察Runx2基因高表达对脐血间充质干细胞成骨分化的影响.方法:①扩增Runx2基因,利用腺病毒载体构建Runx2重组腺病毒(pAd-Runx2),检测病毒滴度后用重组腺病毒感染脐血间充质干细胞,并于荧光显微镜下观察荧光表达变化;②感染后1,3,7,14 d采用实时荧光定量PCR及Western blot检测脐血间充质干细胞Runx2、BMP-2、OCN、ALP的mRNA和蛋白表达.结果与结论:①成功制备pAd-Runx2重组腺病毒,病毒滴度为1.7×1010 pfu/L;②Runx2重组腺病毒感染脐血间充质干细胞后细胞形态呈成骨样细胞改变,对照组细胞无明显变化;③感染组细胞Runx2、BMP-2、OCN、ALP mRNA和蛋白的表达量随感染时间的增加均有不同程度的上调;④结果表明,高表达Runx2基因腺病毒感染脐血间充质干细胞,能够上调BMP-2、OCN、ALP基因的表达,从而促进脐血间充质干细胞的成骨分化.

作者:周大凯;李慧宁;马珊珊;程田

来源:中国组织工程研究 2017 年 21卷 9期

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作者:
周大凯;李慧宁;马珊珊;程田
来源:
中国组织工程研究 2017 年 21卷 9期
标签:
干细胞 脐带脐血干细胞 脐血间充质干细胞 腺病毒载体 Runx2基因 成骨分化 国家自然科学基金
背景:Runx2在成骨分化的信号途径中起核心作用,在诱导干细胞成骨分化及促进骨愈合方面具有重要的研究意义.目的:观察Runx2基因高表达对脐血间充质干细胞成骨分化的影响.方法:①扩增Runx2基因,利用腺病毒载体构建Runx2重组腺病毒(pAd-Runx2),检测病毒滴度后用重组腺病毒感染脐血间充质干细胞,并于荧光显微镜下观察荧光表达变化;②感染后1,3,7,14 d采用实时荧光定量PCR及Western blot检测脐血间充质干细胞Runx2、BMP-2、OCN、ALP的mRNA和蛋白表达.结果与结论:①成功制备pAd-Runx2重组腺病毒,病毒滴度为1.7×1010 pfu/L;②Runx2重组腺病毒感染脐血间充质干细胞后细胞形态呈成骨样细胞改变,对照组细胞无明显变化;③感染组细胞Runx2、BMP-2、OCN、ALP mRNA和蛋白的表达量随感染时间的增加均有不同程度的上调;④结果表明,高表达Runx2基因腺病毒感染脐血间充质干细胞,能够上调BMP-2、OCN、ALP基因的表达,从而促进脐血间充质干细胞的成骨分化.

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