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目的：研究精子鞭毛纤维鞘CABYR结合蛋白（FSCB）在小鼠精子获能过程中发生磷酸化的分子机制。方法取重组FSCB蛋白进行蛋白激酶A（PKA）体外磷酸化实验，反应产物电泳后分别用抗磷酸化PKA底物抗体和抗磷酸化酪氨酸抗体进行免疫印迹分析。取小鼠未获能与获能2 h精子，分别应用抗磷酸化PKA底物抗体、抗磷酸化酪氨酸抗体或FSCB抗体进行免疫共沉淀，免疫共沉淀产物使用FSCB抗体行免疫印迹分析。使用FSCB抗体和磷酸化PKA底物抗体进行免疫荧光定位分析。结果重组FSCB可被PKA催化亚单位体外磷酸化。FSCB在精子获能过程中可以被PKA磷酸化，并可同时发生酪氨酸磷酸化。免疫荧光定位显示FSCB与磷酸化PKA底物共定位于精子主段。结论 FSCB作为PKA作用底物之一参与小鼠精子的获能过程。
作者：刘顺利；陈铭锐；崔庆斌；李彦锋
来源：中华生物医学工程杂志 2015 年 4期
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