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目的探讨细胞水平的雄激素受体(AR)基因敲除方法,为前列腺疾病AR通路的功能研究提供细胞株材料。方法通过在线软件设计针对AR的sgRNA靶向序列,将设计好的sgRNA靶序列克隆到PX330载体中并测序验证。将克隆好的CRISPR?AR载体转染T293细胞,提取DNA,PCR产物酶切和测序鉴定基因敲除效率。结果 CRISPR?AR载体测序证明质粒载体构建成功,293T细胞转染和酶切鉴定实验证明CRISPR?AR载体具有95.3

作者:江福能;陈冠星;梁应科;江敏耀;叶剑恒;刘文华;吴永定;何慧婵

来源:中华生物医学工程杂志 2016 年 22卷 4期

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作者:
江福能;陈冠星;梁应科;江敏耀;叶剑恒;刘文华;吴永定;何慧婵
来源:
中华生物医学工程杂志 2016 年 22卷 4期
标签:
受体,雄激素 前列腺增生 前列腺肿瘤 CRISPR/Cas9 Receptor,androgen Benign prostatic hyperplasia Prostatic neoplasms CRISPR/Cas9
目的探讨细胞水平的雄激素受体(AR)基因敲除方法,为前列腺疾病AR通路的功能研究提供细胞株材料。方法通过在线软件设计针对AR的sgRNA靶向序列,将设计好的sgRNA靶序列克隆到PX330载体中并测序验证。将克隆好的CRISPR?AR载体转染T293细胞,提取DNA,PCR产物酶切和测序鉴定基因敲除效率。结果 CRISPR?AR载体测序证明质粒载体构建成功,293T细胞转染和酶切鉴定实验证明CRISPR?AR载体具有95.3

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