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目的 探讨PI3K/Akt信号通路对深低温低流量小鼠模型的脑保护作用及初步分析其发挥作用的机制.方法 将90只3周龄的C57BL/6健康小鼠数字随机分为假手术组(sham)、模型组(model)和wortmannin组,每组30只.模型组和wortmannin组建立深低温低流量动物模型,假手术组不阻断双侧颈总动脉,其余操作与模型组一样.应用Western Blot技术分别检测各组脑组织中总akt、p-akt1、p-gsk-3β的蛋白表达变化;应用real time RT-PCR方法检测Akt1 mRNA、Akt2 mRNA和Akt3 mRNA的变化及对各时间段脑组织进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、固定、拍照及分析脑组织损伤的情况.结果 各组中总akt蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05);再灌注24 h和72 h模型组的p-akt1、p-gsk-3β蛋白表达增高,差异有统计学意义(P<0.05);而应用wortmannin后p-akt1、p-gsk-3β蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05),与假手术组相比差异无统计学意义(P>0.05).再灌注24h和72 h模型组和wortmannin组相比脑损伤的程度减轻,且差异有统计学意义(P<0.05).再灌注2 h Akt1 mRNA、Akt2 mRNA和Akt3 mRNA的表达三组间差异无统计学意义(P>0.05);再灌注24 h和72 h模型组的Akt1 mRNA和Akt3 mRNA表达高于sham组和wortmannin组,且差异有统计学意义(P<0.05),

作者:杨玉忠;莫绪明;易龙;彭卫;戚继荣;富智;林泽邦

来源:中华小儿外科杂志 2013 年 34卷 10期

知识库介绍

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作者:
杨玉忠;莫绪明;易龙;彭卫;戚继荣;富智;林泽邦
来源:
中华小儿外科杂志 2013 年 34卷 10期
标签:
脑缺血 再灌注损伤 糖原合成酶激酶-3 Brain ischemia Reperfusion injury Glycogen synthase kinase 3
目的 探讨PI3K/Akt信号通路对深低温低流量小鼠模型的脑保护作用及初步分析其发挥作用的机制.方法 将90只3周龄的C57BL/6健康小鼠数字随机分为假手术组(sham)、模型组(model)和wortmannin组,每组30只.模型组和wortmannin组建立深低温低流量动物模型,假手术组不阻断双侧颈总动脉,其余操作与模型组一样.应用Western Blot技术分别检测各组脑组织中总akt、p-akt1、p-gsk-3β的蛋白表达变化;应用real time RT-PCR方法检测Akt1 mRNA、Akt2 mRNA和Akt3 mRNA的变化及对各时间段脑组织进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、固定、拍照及分析脑组织损伤的情况.结果 各组中总akt蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05);再灌注24 h和72 h模型组的p-akt1、p-gsk-3β蛋白表达增高,差异有统计学意义(P<0.05);而应用wortmannin后p-akt1、p-gsk-3β蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05),与假手术组相比差异无统计学意义(P>0.05).再灌注24h和72 h模型组和wortmannin组相比脑损伤的程度减轻,且差异有统计学意义(P<0.05).再灌注2 h Akt1 mRNA、Akt2 mRNA和Akt3 mRNA的表达三组间差异无统计学意义(P>0.05);再灌注24 h和72 h模型组的Akt1 mRNA和Akt3 mRNA表达高于sham组和wortmannin组,且差异有统计学意义(P<0.05),

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