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目的 通过对尿道下裂患儿尿源性干细胞进行多向诱导分化,探讨其诱导分化潜能;利用诱导后的平滑肌样细胞进行复层细胞膜片构建,评价其在无外源性支架情况下获得自体组织工程补片的可行性.方法 程序性添加细胞因子将尿源性干细胞向平滑肌细胞、内皮细胞和神经细胞方向诱导分化,通过实时定量聚合酶链反应、细胞免疫荧光染色鉴定其诱导效率.诱导后的平滑肌样细胞转移入温度敏感型培养皿(NuncUpcell)中,降低温度获得单层细胞膜片,将单层细胞膜片多次叠加,获得复层平滑肌细胞膜片.结果 ①实验中采集到的尿源性干细胞均表达不同程度的Oct4、Sox2、Nanog等胚胎干细胞特异性标志物,且随诱导时间延长,其表达逐渐减低.②在不同方向的诱导过程中,平滑肌、内皮细胞特异性均逐渐增强.平滑肌细胞特异性标志物α-SMA和Desmin的阳性率在诱导前分别为9.350 0%和16.736 7%,在诱导后分别为91.543 3%和89.093 3%,前后比较,差异均有统计学意义(P<0.0001).内皮细胞特异性标志物CD31和vWF的阳性率在诱导前分别为2.613 3%和29.396 7%,在诱导后分别为66.860 0%和74.780 0%,前后比较,差异均有统计学意义(P<0.0001及P=0.0001).神经特异性标志物Nestin的阳性率在诱导前、后分别为49.856 7%和90.990 0%,前后比较,差异有统计

作者:包杰文;黄轶晨;王冰洁;周君梅;谢华;陈方

来源:中华小儿外科杂志 2017 年 38卷 12期

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作者:
包杰文;黄轶晨;王冰洁;周君梅;谢华;陈方
来源:
中华小儿外科杂志 2017 年 38卷 12期
标签:
组织工程 尿道下裂 干细胞 细胞分化 Tissue engineering Hypospadias Stem cells Cell differentiation
目的 通过对尿道下裂患儿尿源性干细胞进行多向诱导分化,探讨其诱导分化潜能;利用诱导后的平滑肌样细胞进行复层细胞膜片构建,评价其在无外源性支架情况下获得自体组织工程补片的可行性.方法 程序性添加细胞因子将尿源性干细胞向平滑肌细胞、内皮细胞和神经细胞方向诱导分化,通过实时定量聚合酶链反应、细胞免疫荧光染色鉴定其诱导效率.诱导后的平滑肌样细胞转移入温度敏感型培养皿(NuncUpcell)中,降低温度获得单层细胞膜片,将单层细胞膜片多次叠加,获得复层平滑肌细胞膜片.结果 ①实验中采集到的尿源性干细胞均表达不同程度的Oct4、Sox2、Nanog等胚胎干细胞特异性标志物,且随诱导时间延长,其表达逐渐减低.②在不同方向的诱导过程中,平滑肌、内皮细胞特异性均逐渐增强.平滑肌细胞特异性标志物α-SMA和Desmin的阳性率在诱导前分别为9.350 0%和16.736 7%,在诱导后分别为91.543 3%和89.093 3%,前后比较,差异均有统计学意义(P<0.0001).内皮细胞特异性标志物CD31和vWF的阳性率在诱导前分别为2.613 3%和29.396 7%,在诱导后分别为66.860 0%和74.780 0%,前后比较,差异均有统计学意义(P<0.0001及P=0.0001).神经特异性标志物Nestin的阳性率在诱导前、后分别为49.856 7%和90.990 0%,前后比较,差异有统计

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