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目的 探讨骨形成蛋白4(BMP4)诱导大鼠H9c2心肌细胞肥大的作用机制.方法 培养大鼠心肌细胞株H9c2,使细胞同步化.实验分2部分,第1部分取同步化的心肌细胞,加50μg·L-1 BMP460μL进行干预,分别在干预后0、1、4、8、12、24 h检测磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)蛋白的表达;第2部分将同步化的心肌细胞随机分为对照组、BMP4组、BMP4+LY294002组及BMP4+3MA组.对照组细胞应用体积分数1%胎牛血清培养基培养;BMP4组细胞应用含50μg·L-1 BMP4的体积分数1%胎牛血清培养基培养;BMP4+LY294002组细胞先应用25μmol·L-1的LY294002预处理120 min,再以含50μg·L-1 BMP4的体积分数1%胎牛血清培养基培养;BMP4+3MA组细胞先应用10 mmol·L-1的自噬抑制剂3MA预处理120 min,再以含50μg·L-1 BMP4的体积分数1%胎牛血清培养基培养.各组细胞给予BMP448 h后采用Image J软件测量细胞表面积.二喹啉甲酸法检测各组心肌细胞内蛋白含量.采用Western blot检测各组细胞给予BMP41 h后磷酸化磷脂酰肌醇3(P-PI3K)、P-Akt及自噬微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白的表达,给予BMP448 h后检测脑钠肽(BNP)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 BMP4作用心肌细胞0、1、4、8、12、24 h后P-Akt蛋白相对表达量分别为0.56±0.02、0.92±0.12、0.42±0.10、0

作者:刘亚坤;吕风华;司澳洋;王卓;吴林

来源:新乡医学院学报 2018 年 35卷 4期

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作者:
刘亚坤;吕风华;司澳洋;王卓;吴林
来源:
新乡医学院学报 2018 年 35卷 4期
标签:
骨形成蛋白4 心肌肥大 磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B信号通路 自噬
目的 探讨骨形成蛋白4(BMP4)诱导大鼠H9c2心肌细胞肥大的作用机制.方法 培养大鼠心肌细胞株H9c2,使细胞同步化.实验分2部分,第1部分取同步化的心肌细胞,加50μg·L-1 BMP460μL进行干预,分别在干预后0、1、4、8、12、24 h检测磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)蛋白的表达;第2部分将同步化的心肌细胞随机分为对照组、BMP4组、BMP4+LY294002组及BMP4+3MA组.对照组细胞应用体积分数1%胎牛血清培养基培养;BMP4组细胞应用含50μg·L-1 BMP4的体积分数1%胎牛血清培养基培养;BMP4+LY294002组细胞先应用25μmol·L-1的LY294002预处理120 min,再以含50μg·L-1 BMP4的体积分数1%胎牛血清培养基培养;BMP4+3MA组细胞先应用10 mmol·L-1的自噬抑制剂3MA预处理120 min,再以含50μg·L-1 BMP4的体积分数1%胎牛血清培养基培养.各组细胞给予BMP448 h后采用Image J软件测量细胞表面积.二喹啉甲酸法检测各组心肌细胞内蛋白含量.采用Western blot检测各组细胞给予BMP41 h后磷酸化磷脂酰肌醇3(P-PI3K)、P-Akt及自噬微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白的表达,给予BMP448 h后检测脑钠肽(BNP)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 BMP4作用心肌细胞0、1、4、8、12、24 h后P-Akt蛋白相对表达量分别为0.56±0.02、0.92±0.12、0.42±0.10、0

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